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混合型生物洗油菌發酵上清液的表麵張力值測定（三）
來源：東北石油大學三亞海洋油氣研究院 黑龍江省科學院微生物研究所 瀏覽 823 次 發布時間:2025-01-03
實施例2
表麵張力測試：采用白金板測定菌株發酵上清液的表麵張力。
將解澱粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（解澱粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1數量比混合）分別接種於LB液體培養基中，在28~30℃條件下振蕩培養發酵，直至發酵液中菌落濃度達到108～109
cfu/mL。
分別取上述各組30 mL發酵菌液，10000×g室溫離心10 min，取各組發酵上清液，利用粉色视频黄色网站測定各組發酵液的表麵張力，測定3次，取平均值，測試結果如表1所示。
表麵張力是洗油劑對原油洗脫能力的重要指標，數值越低、洗脫能力越強。測試結果顯示解澱粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8發酵上清液均能降低表麵張力，混合菌劑發酵上清液的表麵張力值更低。
實施例3
界麵張力測試：在45℃下，采用TX500C界麵張力儀測定菌株發酵上清液與原油間的界麵張力。
將解澱粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（解澱粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1數量比混合）分別接種於LB液體培養基中，在28~30℃條件下振蕩培養發酵，直至發酵液中菌落濃度達到108～109cfu/mL。
分別取上述各組30 mL發酵菌液，10000×g室溫離心10 min，取各組發酵上清液，在45℃下，用TX500C界麵張力儀進行測定，另取同體積的LB液體培養基作為空白組。當連續3次讀數之差在10-3m N/m之內時，即可認為測定的體係已經達到平衡狀態，記錄最終的界麵張力，測試結果如表2所示。
從表2實驗結果中可以看出與空白相比解澱粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8的界麵活性好，油水界麵低至1.92 mN/m和1.90mN/m，為低界麵張力水平。混合菌劑的界麵活性更為突出，低至0.68mN/m。
實施例4
洗油實驗：
將原油與石英砂按照質量比為1∶5攪拌均勻製備油砂，放入60℃烘箱中老化24 h，取出密封備用。
將解澱粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（2組，解澱粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens
）ZZ-11和膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1和3:2數量比混合）分別接種於LB液體培養基中，在28~30℃條件下振蕩培養發酵，直至發酵液中菌落濃度達到108～109cfu/mL。
分別將上述各組30 mL發酵液倒入不同的離心管中，另取同體積30 mLLB液體培養基作為空白組；然後各離心管分別放入上述經過老化的15g的油砂（初始油砂含油量為2.5g），密封，均勻震蕩5次後，放入60℃烘箱靜置，24 h後取出。傾倒盡上層液體後，用20~25℃蒸餾水反複衝洗至水相無色，並收集合並衝洗液。
再將油砂烘幹進行稱量（離心管+油砂），質量為m1，離心管的質量為m0。
洗油效率η通過如下公式進行計算：
η=(15-(m1-m0))/2.5
各組洗油效率測試結果如表3所示，解澱粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8發酵液均具有優秀的洗油效率，本發明混合菌劑的洗油效率更為優異，分別達到84.39%和93.32。
綜合實施例1~4的測試結果說明解澱粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8均可作為生物洗油菌；本發明混合菌劑能將油從油砂表麵分離開來，洗油後油砂潔淨、鬆散，有防止原油再粘附的作用，具有十分優異的洗油效果。